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二十六、双向凝胶电泳(2-DE)
双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。
二十七、mRNA的分离与纯化(寡聚(dT)纤维素柱纯化mRNA)
真核细胞的mRNA分子...
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十六、cDNA
末端快速扩增 (rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术
cDNA
末端快速扩增 (rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术是一种基于mRNA反转录和
PCR技术建立起来的、以部分的已知区域序列...
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九、RT-PCR
RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成
cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在佳条件下进行。
实验步...
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一、GST
pull-down实验
基本原理:将靶蛋白-GST融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过SDS-PAGE电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应...
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