基因组编辑是利用各种技术对细胞或生物体的基因组DNA序列进行永久性改变。早期的基因组编辑方法,例如使用锌指核酸酶(ZFN)或转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)的方法昂贵、缓慢且困难。而由CRISPR(Clustered Regularly InterspacedShort Palindromic Repeats)介导的基因组编辑对于许多应用来说非常可靠和灵活。此系统的编辑能力远超基于ZFN和基于TALEN的方法,已证明可在各类生物学系统中对目标基因组的特定位置进行高效的编辑。
CRISPR-Cas9 crRNA应与tracrRNA一起使用以形成具有功能的gRNA二聚体,适用于大多数应用。
CRISPR-Cas9 crRNAXT应与tracrRNA一起使用以形成具有功能的gRNA二聚体,在细胞内具有更高的稳定性。
CRISPR-Cas9 sgRNA是由crRNA和tracrRNA序列组成的单链RNA分子,适用于具有挑战的实验条件。
CRISPR-Cas9 tracrRNA包含通用的67个碱基,专有的化学修饰可增加其核酸酶抗性。与crRNA杂交,激活Cas9酶。
CRISPR-Cas12a crRNA结合到与TTTV PAM序列相对的DNA链的21-24个碱基上,激活Cas12a。
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